近日，韩国研究者们在《科学免疫学》（*Science Immunology*）期刊上发表了一项重要研究成果，揭示了癌细胞通过细胞接触反制理想状态下的又一重机制：人体内多种实体瘤都存在连接蛋白-4（CNTN-4）的过表达，它会与T细胞表面的淀粉样前体蛋白（APP）结合，抑制T细胞与癌细胞的接合（conjugation）并下调T细胞的激活状态。因此，CNTN4-APP是一个值得靶向的免疫抑制性通路。
#### 研究背景
淀粉样前体蛋白（APP）和连接蛋白-4（CNTN-4）在阿尔茨海默病（AD）研究中较为知名，但它们在癌症领域的研究较少。韩国研究者们的初步分析显示，至少有13种实体瘤（共分析21种）组织的CNTN4强阳性（≥1+）率超过了50%。这一发现提示，CNTN4在癌症领域可能被忽视了太久。
#### 研究方法与结果
1. **癌细胞的CNTN4表达**：
- 研究者们敲除癌细胞的Cntn4或使其过表达，发现癌细胞增殖速率、迁移能力和侵袭性等关键特征并未显著改变。
- 然而，过表达Cntn4会使癌细胞的凋亡通路和TNF-α等炎症应答通路显著下调。
2. **CNTN4对T细胞的影响**：
- 用重组CNTN4蛋白处理激活的T细胞，可直接抑制T细胞增殖和细胞因子分泌两大关键功能，效果甚至比重组PD-L1更强。
- 进一步的实验和染色质免疫沉淀（ChIP）分析显示，重组CNTN4抑制T细胞的机制主要是在T细胞激活时阻碍转录因子p65和NFATc1转位入核，结合到IFN-γ和TNF-α两大关键细胞因子的编码基因启动子部位。
- 同时，CNTN4还会通过抑制关键蛋白的磷酸化，干扰T细胞受体（TCR）信号级联。
3. **T细胞表面的受体**：
- 研究者们采用在人类质膜蛋白库中筛选的方法，找到了两种能与CNTN4结合的APP同源异构体（APP770/751）。
- 重组CNTN4与表达APP的T细胞结合，类似于PD-1/L1的相互作用。
4. **功能验证**：
- 特异性敲除T细胞的App，可显著增强T细胞对癌细胞的黏附能力、细胞毒性和T细胞本身的增殖能力，全方面上调抗肿瘤免疫应答。
- APP和CNTN4在细胞外的相互作用可能对T细胞功能影响更明显。
- 以APP为靶标设计的单抗，也可以起到与抗CNTN4单抗相似的抑癌效果。
#### 临床意义
研究者们分析了胃癌、肺癌等常见实体瘤患者的数据，证实CNTN4表达水平与免疫激活标志物（GZMB、CXCL9/10等）及接受免疫治疗患者的生存预后大多呈负相关性。APP表达水平也与患者治疗应答有关，说明CNTN4-APP相互作用可能参与了当前免疫治疗的耐药。
#### 结论与展望
1. **CNTN4-APP相互作用的实锤**：
- CNTN4在多种实体瘤中过表达，通过与T细胞表面的APP结合，抑制T细胞功能，从而形成一个新的免疫抑制性通路。
2. **潜在的治疗策略**：
- 抗CNTN4或抗APP单抗既可以与PD-1/L1抑制剂协同增效，也有望作为免疫后线治疗使用，特别是对CNTN4或APP高表达、当前预后可能较差的患者。
3. **未来方向**：
- 进一步研究CNTN4-APP相互作用的详细机制，开发更有效的靶向治疗策略。
- 探索CNTN4和APP在不同癌症类型中的表达模式和功能，为个性化治疗提供依据。
总之，这项研究揭示了CNTN4-APP相互作用在癌症免疫抑制中的重要作用，为开发新的免疫治疗策略提供了新的靶点和思路。
